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名称核酸抽提与纯化点击预约

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核酸抽提与纯化

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    3-4

服务价格

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实验详情

核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。在分离核酸时应遵循以下原则:保证核酸分子一级结构的完整性;排除其他分子污染。

技术方案

PC抽提法

PC 抽提是去除蛋白质有效的手段,但超过了该饱和度,裂解体系中的蛋白质不会被一次去除,必须靠多次抽提,方可彻底去除。且每次抽提都会损失部分核酸。另外,体系太粘稠的坏处是,蛋白质难以彻底去除,以及基因组 DNA 会断裂得更厉害,所以要注意裂解液与样品的比例。PC 抽提的另外一个用途是,利用酸性酚可以部分去除 DNA 的特点,在 RNA 抽提时获得 DNA 残留极少的 RNA。不过有一点要提醒的是,某些植物样品,在去除某些杂质之前,是不能使用 PC 抽提的,否则核酸必定降解。PC抽提最大的优势是成本低廉,对实验条件要求较低。

高盐沉淀法

高盐沉淀蛋白质/醇沉淀方法,同样也是一个非常不错的方法。与 PC 抽提方法相比,除了纯度的稳定性可能要低一点外,该方法几乎克服了 PC 抽提的所有缺点。更快、更轻松的去除蛋白质所可以用于大规模抽提,但其不足之处是纯度 (蛋白质残留) 不够稳定,蛋白质的沉淀效率在4℃会更好一些。

离心柱法

离心柱纯化法,是目前试剂盒提取广泛应用的方法。其最大特点是受人为操作因素影响小,纯度的稳定性很高 (虽然纯度不一定比PC 纯化方法更高)。加入的液体通过离心后会进入另外一个离心管中,与含有核酸的柱子完全是分开的,所以洗涤更彻底。其致命弱点是样品过量,提取效率较低,且需要反复离心,操作复杂,成本也较高。

 生物磁珠法

生物磁珠法是将纯化介质包被在纳米级生物磁珠表面,通过介质对核酸的吸附,在外加磁场下使核酸附着于磁珠定向移动,从而达到固液分离纯化的作用。与其他几种方法相比,生物磁珠法具有很多无法比拟的优势。

技术服务

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新鲜样品需冷冻运输,固定样品需讨论确定固定方法。(或基因组)

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2.结果分析报告

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0571-8662927


E-mail

sale@hzpmrc.com

 

 

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